?? 作者:zhuobo?? 發布時間:2021-03-15 15:16:30?? 瀏覽次數:1
組培設備的培養是指將培養材料放入培養室中使其生長,通過分裂和分化形成愈傷組織,在光照條件下進一步分化為再生植物的過程。這句話可能有些小伙伴還是了解不了,沒關系,下面咱們就來具體了解一下。
一、組培設備培養方法
1.固體培養法
即用瓊脂固化培養基來培養植物材料的方法。是現在常用的方法。雖然該方法設備簡單,易行,但養分分布不均,生長速度不均衡,并常有褐化中毒現象發生。
2.液體培養法
即用不加固化劑的液體培養基培養植物材料的方法。由于液體中氧氣含量較少,所以通常需要通過攪動或振動培養液的方法以確保氧氣的供給,采用往復式搖床或旋轉式搖床進行培養,其速度一般為50~100r/min,這種定期浸沒的方法,既能使培養基均一,又能保證氧氣的供給。
二、組培設備培養步驟
1.初代培養
初代培養旨在獲得無菌材料和無性繁殖系。即接種某些外植體后,初的幾代培養。初代培養時,常用誘導或分化培養基,即培養基中含有較多的細胞分裂素和少量的生長素。初代培養建立的無性繁殖系包括:莖梢、芽叢、胚狀體和原球莖等。根據初代培養時發育的方向可分為:
1)頂芽和腋芽的發育
采用外源的細胞分裂素,可促進使具有頂芽或沒有腋芽的休眠側芽啟動生長,從而形成一個微型的多枝多芽的小灌木叢狀的結構。在幾個月內可以將這種叢生苗的一個枝條轉接繼代,重復芽苗增殖的培養,并且迅速獲得多數的嫩莖。然后將一部分嫩莖轉移到生根培養基上,就能得到可種植到土壤中去的完整小植株。一些木本植物和少數草本植物也可以通過這種方式來進行再生繁殖,如月季、茶花、菊花、香石竹等等。這種繁殖方式也稱作微型繁殖,它不經過發生愈傷組織而再生,所以是能使無性系后代保持原品種的一種繁殖方式。
適宜這種再生繁殖的植物,在采樣時,只能采用頂芽、側芽或帶有芽的莖切段,其他如種子萌發后取枝條也可以。
莖尖培養可看作是這方面較為特殊的一種方式。它采用幼嫩的頂芽的莖尖分生組織作為外植體進行接種。在實際操作中,采用包括莖尖分生組織在內的一些組織來培養,這樣便保證了操作方便以及容易成活。
用靠培養定芽得到的培養物一般是莖節較長,有直立向上的莖梢,擴繁時主要用切割莖段法,如香石竹、矮牽牛、菊花等。但特殊情況下也會生出不定芽,形成芽叢。
2)不定芽的發育
在培養中由外植體產生不定芽,通常首先要經脫分化過程,形成愈傷組織的細胞。然后,經再分化,即由這些分生組織形成器官原基,它在構成器官的縱軸上表現出單向的極性(這與胚狀體不同)。多數情況下它形成芽,后形成根。
另一種方式是從器官中直接產生不定芽,有些植物具有從各個器官上長出不定芽的能力如矮牽牛、福祿考、懸鉤子等。當在試管培養的條件下,培養基中提供了營養,特別是提供了連續不斷植物激素的供應,使植物形成不定芽的能力被大大地激發起來。許多種類的外植體表面幾乎全部為不定芽所覆蓋。在許多常規方法中不能無性繁殖的種類,在試管條件下卻能較容易地產生不定芽而再生,如柏科,松科,銀杏等一些植物。許多單子葉植物儲藏器官能強烈地發生不定芽,用百合鱗片的切塊就可大量形成不定鱗莖。
在不定芽培養時,也常用誘導或分化培養基。用靠培養不定芽得到的培養物,一般采用芽叢進行繁殖,如非洲菊、草莓等。
3)體細胞胚狀體的發生與發育
體細胞胚狀體類似于合子胚但又有所不同,它也通過球形,心形,魚雷形和子葉形的胚胎發育時期,終發育成小苗。但它是由體細胞發生的。胚狀體可以從愈傷組織表面產生,也可從外植體表面已分化的細胞中產生,或從懸浮培養的細胞中產生。
4)初代組培外植體的褐變
外植體褐變是指在接種后,其表面開始褐變,有時甚至會使整個培養基褐變的現象。它的出現是由于植物組織中的多酚氧化酶被激活,而使細胞的代謝發生變化所致。在褐變過程中,會產生醌類物質,它們多呈棕褐色,當擴散到培養基后,就會控制其他酶的活性,從而影響所接觸外植體的培養
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